Антитела к Borrelia, IgG (иммуноблот)

Возбудителем болезни Лайма, боррелиоза являются бактерии, которые в совокупности относятся к виду Borrelia burgdorferi sensu lato. Данная тяжелая патология является одной из самых распространенных на территории РФ, в которой постоянно возникают природные очаги с трансмиссивным способом перехода заболевания. Во всем мире на сегодняшний день известно больше 10 видов Borrelia burgdorferi sensu lato, в т. ч. тех, что строго связаны с Евразийским континентом (B. afzelii, B. Turdi, B. japonica, B. garinii, B. lusitaniae, B. sinica, B. tanukii, B. Spielmanii и B. valaisiana), 3 вида ассоциируется только с Соединенными штатами Америки (B. Californiensis, B. Andersonii и B. carolinensis).

Попадает в организм человека возбудитель Borrelia burgdorferi при укусе иксодового клеща, у которого инфекция сохраняется на протяжении всей жизни. Период инкубации болезни занимает от одной до двух недель. Существует ранняя (локализованная), диссеминированная и поздняя инфекция. В точке проникновения возбудителя в организм возникает эритема мигрирующего характера (в ряде случаев это единственное клиническое проявление ранней фазы заболевания), которая сохраняется в течение одного месяца. К большому сожалению, примерно у 30-45% пациентов болезнь Лайма может протекать и в безэритемной форме. Потом, у 10-25% больных при диссеминации происходит развитие признаков поражения лицевого нерва (менингополирадикулоневрит, менингит, периферический паралич лицевого нерва); поражение опорно-двигательного аппарата (у 60 больных), сердечно-сосудистой системы. При второй стадии болезни в течение первых двух лет от начала инфекции, клинические признаки проявляются вялостью, поражением нервной системы, суставов. Патогномоничное поражение кожного покрова проявляется атрофическим акродерматитом.

Лабораторные и клинические особенности, выявленные у пациентов с признаками персистенции боррелиозной бактерии (к примеру, выявление ревматоидных факторов в составе крови), указывает на возможность развития аутоиммунных процессов, которые формируются из-за молекулярной мимикрии между тканями инфицированного человека и антигенами боррелий, обусловливающих вариации развития болезни Лайма, устойчивые к терапии антибиотиками.

Диагностирование данного заболевания (Лайма) в основном основывается на серологическом исследовании (иммуноблот, ИФА) и молекулярно-генетических (ПЦР) методиках анализирования.

Усовершенствование серологического способа диагностирования боррелиоза дает возможность в большинстве государств в последнее время перейти от трехшагового принципа лабораторного тестирования на двухшаговую методику – иммуноблоттинг, ИФА.

Так, отрицательный ответ серологических исследований на ранней стадии заболевания не всегда подтверждает ее отсутствие и необходима повторная проверка динамики течения патологии через 15-25 дней. На хронической и диссеминированной стадиях специфические типы антител к возбудителю присутствуют практически всегда. Антитела IgG класса циркулируют в составе крови продолжительный срок (от пары месяцев до пары лет), и даже после применения эффективной антимикробной терапии и полного излечения данной инфекции. По этой причине по наличию и титру антител судить об эффективности и успешном завершении терапии нельзя. Иммунитет против Borrelia burgdorferi не является стерильным, по этой причине у лиц, переболевших данным заболеванием, вероятен риск повтора инфицирования через несколько лет. Определение антител к Borrelia burgdorferi клиническими проявлениями болезни Лайма сопровождается не всегда. В соответствии с двухшаговым принципом подтверждения в условиях лаборатория этого диагноза, позитивные ответы, полученные ИФА методом, в обязательном порядке должны получить подтверждение и иными методиками.

С целью исключения получения ложноположительных ответов ИФО, подтверждения диагноза, дифференциации, наблюдения за течением болезни рекомендуется применить методику иммуноблота, дающего возможность по отдельности выявлять IgM и IgG к отдельным белкам боррелий. Существенное значение для дифференциальной диагностики имеет определение IgM: OspC и IgG: VlsE (Variable major protein-like sequence, Expressed), позволяющего произвести быструю интерпретацию. Существенную значимость для референс-исследований вместе с данными белками имеет выявление и иных специфических антигенов.

Состав применяемых для определения антител к Borrelia специфических антигенов:

Поставщиком антигенов для тестов Anti-Borrelia EUROLINE-WB выступает специально подобранный штамм Borrelia afzelii. Тестовый комплект включает в себя тестовые стрипы с электрофоретически разделенными экстрактами с антигенами Borrelia afzelii и чип мембранный с рекомбинантным типом антигена VlsE (основная экспрессированная белковоподобная вариабельная последовательность).

• в качестве дополнения и подтверждения результатов ИФА-методов серологического диагностирования боррелиоза (см. тесты Антитела к боррелиям IgM, IgG), при наличии подозрения на боррелиоз иксодовый клещевой (болезнь Лайма);
• патологические ассоциированные состояния: мигрирующая (хроническая) эритема, кожный (доброкачественный) лимфаденоз, атрофический акродерматит хронического характера, кардит, артрит, нейроборрелиоз.

Особых требований относительно подготовки к сдаче тестов нет. Необходимо придерживаться простых правил:

• анализ сдается минимум через 4 часа после приема пищи;
• пациент должен находиться в состоянии полного покоя 30 минут;
• следует отказаться от курения и употребления алкогольных напитков.

Взятие биоматериала необходимо проводить также до начала лечения противовирусными, антибактериальными, противопаразитарными средствами.

Во время исследований для контроля терапии целесообразно взятие проб не раньше, чем через 1,5-2 недели после завершения применения соответствующих лекарственных препаратов, имеющих локальный тип воздействия и не раньше, чем через 30 дней после проведения системных терапевтических мероприятий.

Все перечисленные правила желательно соблюдать неукоснительно, если лечащим врачом не выдвинуты иные условия.

В целях усовершенствования предоставляемых лабораторией услуг возможны изменения технологий исполнения исследований.

Важно понимать, что интерпретация данных исследований является прерогативой лечащего врача. Категорически нельзя использовать полученную информацию для самодиагностики и самостоятельного лечения. Специалист ставит точный диагноз, основываясь как на данные теста, так и за счет сбора информации от пациента, пользуясь другими источниками, исследованиями, анамнезом и т. д.

Специальный формат выдачи полученного результата исследования качественный (описание отсутствия/наличия полос, которые характеризуют определение антител к каждому из перечисленных антигенов, в форме «положительно», «слабоположительно» или «отрицательно»; общее заключение о данных исследования в форме «положительный»/«отрицательный»).

При общем определении результата учитывается положение окрашенных полос (специфичность антигена) и степень интенсивности их окрашивания (так как иногда вероятна неспецифическая ложная слабая реакция с отдельными антигенами).

Отрицательный: полосы специфических антигенов отсутствуют; присутствие одной слабой или четкой полоски специфического антигена: р83, p39, p31, p30, OspC (p25), p21, p19, p17; наличие слабо окрашенной полосы специфичного антигена VlsЕ.

Положительный: положительная полоса антигена VlsE; наличие полосы VlsE слабой интенсивности окрашивания и четкой полосы иного специфического антигена; наличие двух и более полос специфических антигенов.

Дополнительный объем информации о клинической значимости и интерпретации данных исследования «Антитела класса IgG к Borrelia burgdorferi, определяемые методом иммуноблоттинга (anti-Borrelia burgdorferi IgG, Immunoblot)» см. в тесте Антитела класса IgG к Borrelia burgdorferi.