ИГХ опухоли молочной железы

Комплекс «Золотой стандарт» - это ряд гистохимических тестов, применяемых для уточняющей диагностики, определения биологического потенциала онкологического новообразования, прогноза течения заболевания, подбора индивидуальных схем эффективного лечения рака молочной железы (РМЖ).

Исследование экспрессии рецепторов эстрогенов и прогестерона.

Подавляющее большинство раковых новообразований (75%) имеют гормонально-зависимую природу. Стимулирующий эффект на опухоль оказывается прогестероном и эстрогенами. Если данные гормоны отсутствуют, то опухоли попросту не способны разрастаться, а погибают еще на стадии формирования.При этом, и прогестерон и эстрогены играют существенную роль при формировании ряда видов онкологии молочной железы.

Эстрогены – это факторы активации пролиферации и роста клеток, в которых содержатся эстрогеновые типы рецепторов, в органах женской гинекологической системы и опухолевых клетках молочной железы.

Прогестерон – также представляет собой способствующий формированию онкологической патологии фактор.

В случае, когда на поверхности раковых клеток сниженная численность эстрогеновых рецепторов (опухоли гормонально-негативного типа), применение гормональной терапии какого-либо эффекта не дает. Но если при этом на опухолевых клетках присутствуют прогестероновые рецепторы, то использование гормональной терапии может дать позитивный результат. Нужно отметить, что в случае, когда раковые клетки имеют прогестероновые рецепторы, но нет эстрогеновых, возможность того, что гормональное лечение будет успешней приблизительно на 10%.

Рецепторы прогестерона и эстрогенов – это первые клеточные маркеры, вошедшие в практику, роль которых в генезе гормонозависимых новообразований доказана массой проведенных исследований. Выявление рецепторов прогестерона и эстрогена в опухолевой ткани на данный момент рассматривается в качестве обязательного условия для проведения успешной гормонотерапии рака молочной железы. Также от наличия прогестероновых и эстрогенных рецепторов зависит и степень реактивности на применяемую гормональную терапию для лечения опухоли: эффективность при эстроген-негативных новообразованиях составляет приблизительно 10%, при эстроген-позитивных опухолях приблизительно 50%, и около 75% при новообразованиях, в которых присутствуют рецепторы как эстрогенов, так и прогестерона. Но при этом, в медицинской практике наблюдаются случаи устойчивости (резистентности) к применяемой гормональной терапии у пациентов с прогестерон- и эстроген-позитивными новообразованиями, по этой причине гормонально-рецепторный статус онкологического образования не всегда представляет собой достаточный показатель гормональной чувствительности онкологии (рака) молочной железы.

Частота встречаемости гормональных рецепторов на поверхности клеток РМЖ:

• Приблизительно 75% всех раковых новообразований молочной железы эстроген-позитивны (ЭР+).
• Приблизительно 65% эстроген-позитивных опухолей обладают такими же рецепторами к прогестерону (ЭР+/ПР+).
• Приблизительно 25% всех раковых новообразований молочной железы эстроген-прогестерон-негативны (ЭР-/ПР-), либо неизвестен их гормональный статус.
• Приблизительно 10% всех раковых новообразований молочной железы эстроген-позитивны и при этом прогестерон-негативны (ЭР+/ПР-).
• Приблизительно 5% всех раковых новообразований молочной железы эстроген-негативны и при этом прогестерон-позитивны (ЭР-/ПР+).

В приведенных данных термин «позитивные» означает, что на клеточной поверхности присутствует существенная численность рецепторов, «негативные» - означает малое количество рецепторов. В ряде случаев независимая лаборатория возможно выдаст ответ такого типа: «гормональный статус опухоли неизвестен».

HER 2 статус

На сегодняшний день специалисты рекомендуют исследовать присутствие гиперэкспрессии HER2/neu(с-erbB-2) и возможность применения HER2/neu антител для терапии рака молочной железы самостоятельно или в комплексе c химиотерапией. Гиперэкспрессия данного гена определяется в опухолевой ткани приблизительно у трети пациентов с РМЖ и проводится ассоциация с крайне неблагоприятным прогнозом и низкой степенью чувствительности к химиотерапии и тамоксифену. Применение моноклональных антител к HER2/neu (герцептин, трастузумаб) понижает резистентность (устойчивость) таких новообразований к определенным видам химиотерапии и существенно повышает в процентном соотношении количество пациентов, у которых удалось достигнуть ремиссии.

Исследование экспрессии Ki-67 (пролиферативная активность).

Индекс пролиферации клеток опухоли, оценивающий по экспрессии Ki-67, тоже изучается в качестве прогностического фактора при раке молочной железы. У новообразований низкодифференцированного типа пролиферативная активность повышена, чем у высокодифференцированных. Приблизительно 80% новообразований с гиперэкспрессией HER2/neu обладают высокой пролиферативной активностью.

На сегодняшний день общепринятым «золотым стандартом» диагностирования рака молочной железы является комплексное выявление чувствительности клеток опухоли к рецепторам прогестерона и эстрогенов с определением пролиферативной активности и герцепт-статуса.

Особые условия подготовки определяются лечащим врачом. Что касается иных требований, то необходимо придерживаться простых правил:

• пациент должен находиться в состоянии полного покоя 30 минут;
• следует отказаться от курения и употребления алкогольных напитков.

При приеме каких-бы ни было лекарственных препаратов, есть смысл проконсультироваться с лечащим врачом о целесообразности проведения тестов или правильно подойти к вопросу отмены применяемого средства.

• с целью гистологического исследования биоптатов молочной железы (путем окрашивания гематоксилином-эозином);
• с целью иммуногистохимического исследования экспрессии рецепторов прогестерона и эстрогенов (пероксидазно-антипероксидазный и авидин-биотиновый методы);
• с целью иммуногистохимического исследования экспрессии HER2 (пероксидазно-антипероксидазный и авидин-биотиновый методы);
• с целью иммуногистохимического исследования экспрессии Ki-67 (пероксидазно-антипероксидазный и авидин-биотиновый методы);

Показания к назначению: рак молочной железы, для прогнозирующей оценки и подбора адекватного лечения.

Иммуногистохимический (ИГХ) метод исследования дает возможность определять и оценивать молекулярно-биологические факторы, влияющие на прогноз и выбор лекарственного воздействия на рак молочной железы. К данным факторам относят экспрессию в клетках опухолевой ткани рецепторов стероидных гормонов: ядерного антигена Ki–67 (показатель пролиферативной активности), прогестерона и эстрогена, онкопротеина HER2/neu(c-erbB-2).

Важно понимать, что интерпретация данных исследований является прерогативой лечащего врача. Категорически нельзя использовать полученную информацию для самодиагностики и самостоятельного лечения. Специалист ставит точный диагноз, основываясь как на данные теста, так и за счет сбора информации от пациента, пользуясь другими источниками, исследованиями, анамнезом и т. д.

Форма предоставления результата: ответ описательный с отражением численности Н-баллов клеток, количества баллов определения гиперэкспрессии HER2, экспрессирующих рецепторов прогестерона и эстрогена, процента пролиферирующих клеток:

1. Морфологическое определение новообразования молочной железы, в соответствии с классификацией ВОЗ (2012).
2. Экспрессия рецепторов прогестерона и эстрогенов. Для определения экспрессии рецепторов прогестерона и эстрогенов производится подсчет численности окрашенных визуализирующим агентом ядер опухолевых клеток. Подсчет иммуноположительных клеток производится в зонах с максимальным проявлением диаминобензидина при анализе не менее 300 клеток. Для определения ИГХ данных экспрессии прогестерона и эстрогенов применяется балльная шкала, учитывающая процент окрашенных клеток и степень выраженности экспрессии. Интенсивность окрашивания — баллы IS:
   • нет окрашивания — 0;
   • слабо интенсивное окрашивание — 1ISxNx;
   • умеренно интенсивное окрашивание — 2ISxNx;
   • сильно интенсивное окрашивание — 3ISxNx.

   Определение общего балла H: H= 1ISxNx+ 2ISxNx+ 3ISxNx, где N— число положительных ядер.

3. Экспрессия с-erbB-2. Иммуногистохимическое исследование HER2-статуса оценивается балльной шкалой с оценками 0, 1+, 2+, 3+. 4.
4. Индекс пролиферации Ki-67. Производится подсчет численности окрашенных визуализирующим агентом ядер клеток опухоли, учитывающих процентное соотношение неокрашенных/окрашенных клеточных ядер на 100 учтенных клеток в 10 репрезентативных полях зрения при возрастании х40.

Референсные значения и интерпретация:

Спектр значений строго индивидуален, имеет значение установленный клинический диагноз, собранный анамнез, уже проведенное лечение и иные факторы.